帶你了解尺寸排阻色譜柱的相關知識點

尺寸排阻色譜柱由親水性球形聚甲基丙烯酸酯顆粒填充，主要針對小分子蛋白、蛋白片段、多肽、寡核苷酸的分離分析。

 

特點：

 

1.保留時間是分子尺寸的函數，有可能提供分子結構的某些信息。2.保留時間短，譜峰窄，易檢測，可采用靈敏度較低的檢測器。

3.固定相與分子間作用力極弱，趨于零。由于,柱子不能很強保留分子因此柱壽命長。

4.不能分辨分子大小相近的化合物，相對分子質量差別必須大于10％能得以分離。

5.大分子的流程短，移動速度快，先流出色譜柱；小分子的流程長，移動速度慢，后流出色柱；而中等分子居兩者之間。

6.生物相容性好，有很高的活性回收率。

 

流動相的選擇：

 

排阻色譜所選用的流動相必須能溶解樣品，并必須與凝膠本身非常相似，這樣才能潤濕凝膠。當采用軟性凝膠時，溶劑也必須能溶脹凝膠。溶劑的粘度要小，因為高粘度溶劑往往限制分子擴散作用而影響分離效果。

 

尺寸排阻色譜柱的保存：

 

日常使用中，建議保存在150mM磷酸鹽緩沖液中(pH7.0)。如長期不用時，可將色譜柱保存至20%乙醇中，以防止菌體污染。(注：可根據具體使用條件選擇保存方式，如實驗條件為緩